Ocena żywotności metodą eozyna-nigrozyna

Wytyczne WHO z roku 2021 rekomendują barwienie eozyna-nigrozyna jako podstawowe barwienie do oceny żywotności plemników. Najważniejsze powody rekomendowania tej właśnie metody są następujące: 1. ciemne wybarwienie tła pozwala na lepszą ocenę komórki plemnikowej, dzięki większemu kontrastowi pomiędzy główką plemnika a otoczeniem, 2. możliwość przechowywania i późniejszej oceny wybarwionych szkiełek (np. w celu re-ewaluacji czy kontroli jakości).

Poniżej znajduje się ilustracja z „WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen” (6th edition, 2021) obrazująca barwienie eozyna-nigrozyna. Plemniki oznaczone literką L zostały ocenione jako żywe, a literką D jako martwe. Kolejny obrazek przedstawia inne zdjęcia uzyskane z tego samego barwienia.

Wykonanie barwienia jest stosunkowo proste:

1. Po dokładnym wymieszaniu próbki pobrać  50µl nasienia oraz tyle samo roztworu eozyna-nigrozyna. Wymieszać (np. w probówce) i odczekać 30 sekund.
2. Wykonać rozmaz na szkiełku podstawowym i pozostawić do wyschnięcia na powietrzu.
3. Oceniać szkiełka w powiększeniu 1000x i pod immersją, po wyschnięciu lub po utrwaleniu za pomocą żywicy lub podobnej metody.

Z0BACZ TAKŻE

Test hipoosmotyczny plemników (test HOS) – ocena żywotności plemników

Jedną z metod oceny żywotności plemników rekomendowanych przez WHO 2010 jest test hipoosmotyczny, znany też... Więcej →

Test HBA (wiązania z hialuronianem) – czy plemniki funkcjonują poprawnie?

Choć badanie ogólne nasienia powinno być jednym z pierwszych elementów diagnostyki pary mającej problem... Więcej →

Podręcznik analizy nasienia WHO 2021 – jakie zmiany w porównaniu z wersją 2010?

W sierpniu 2021 WHO opublikowało nowe rekomendacje dotyczące badania nasienia (WHO laboratory manual for the... Więcej →