Barwienie plemników metodą Shorr’a do oceny morfologii
5 marca 2019
Jedną z rekomendowanych przez WHO 2010 metod barwienia plemników służącą do oceny ich morfologii jest barwienie metodą Shorr’a. Przed wykonaniem barwienia należy wykonać rozmaz nasienia na szkiełku podstawowym. W tym celu należy nanieść kroplę dokładnie wymieszanego nasienia na koniec szkiełka i wykonać pewnym, nieprzerwanym ruchem rozmaz za pomocą krawędzi drugiego szkiełka (należy „ciągnąć” kroplę nasienia za szkiełkiem rozmazującym, a nie ją „pchać”. Dla każdego pacjenta należy wykonać dwa rozmazy. Po wysuszeniu rozmazów (ok. 15 minut w temperaturze pokojowej) wykonuje się utrwalenie a następnie barwienie preparatu zanurzając szkiełko w szeregu odczynników wg kolejności przedstawionej poniżej. W prawej kolumnie przedstawiono czas na jaki należy zanurzyć preparat albo ilość jego zanurzeń jaką powinno się wykonać.
W metodzie Shorr’a główki plemników barwią się na kolor niebieski (jasno-niebieski akrosom i ciemno-niebieska/granatowa część postakrosomalna główki). Nadmiar resztkowej cytoplazmy (w obrębie wstawki) barwi się na kolor czerwono-pomarańczowy. Witka barwi się kolor niebieski lub czerwonawy.
|
Odczynniki |
Czas zanurzenia / ilość zanurzeń preparatu w odczynniku |
| 1. Etanol 75% (v/v) – utrwalanie |
1 godzina |
| 2. Woda bieżąca |
12-15 zanurzeń |
| 3. Hematoksylina Harrisa |
1-2 min. |
| 4. Woda bieżąca |
12-15 zanurzeń |
| 5. Etanol amonowy |
10 zanurzenia |
| 6. Woda bieżąca |
12-15 zanurzeń |
| 7. Etanol 50% (v/v) |
5 min. |
| 8. Barwnik Shorr’a |
3-5 min. |
| 9. Etanol 50% (v/v) |
5 min. |
| 10. Etanol 75% (v/v) |
5 min. |
| 11. Etanol 95% (v/v) |
5 min. |
Dla prawidłowej oceny morfologii plemników wybarwiony preparat należy oglądać pod immersją. Zgodnie z zalecaniemi ocenia się minimum 200 plemników na każdym ze szkiełek.
Innymi zalecanym przez WHO 2010 metodami barwienia do oceny morfologii plemników jest barwienie metodą Papanicolau oraz Diff Quick.
Opublikowani: 5.03.2019